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極性改性反相色譜柱的日常維護
  • 更新日期：2014-10-13     信息來源：本站      瀏覽次數(shù)：3516

      • 極性改性反相色譜柱的日常維護

      正確使用緩沖鹽
      緩沖鹽通常易溶于水，難溶于有機溶劑，因此緩沖鹽使用不當(dāng)會使其析出，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙，使填料板結(jié)，柱壓上升；同時阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展，使色譜柱的保留能力下降，柱效降低。緩沖鹽析出后，去除非常困難，因此，正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要。
      正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話：使用前要過渡，使用后要沖洗。具體方法如下：     
      1. 等度條件：使用緩沖鹽前需用過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗30min，
      使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0.2ml/min流速沖洗
      色譜柱過夜。
      2. 梯度條件：用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前，用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗30min；分析完成后，再用該過渡流動相以1.0ml/min沖洗色譜柱45min。含緩沖鹽流動相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩，以避免梯度過程中緩沖鹽析出。
      注意：過渡流動相是指有機相和水相的組成與分析流動相相同，區(qū)別只是過渡流動相中不含緩沖鹽。
      3. 緩沖鹽析出的補救方法：
         1）方案1：用甲醇/水＝20/80以1.0ml/min流速35℃條件下反向沖洗色譜柱120min；
         2）方案2：用甲醇/水＝20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜。

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